pki

Binding-Dependent Disorder-Order Transition in PKI: A Fluorescence Anisotropy Study @import url(/styles/article.css); @import url(/styles/article-ie.css); Table of Contents | Journal Home Page | Search the Journals Full Text HTML Download Citation Purchase Article Biochemistry, 38 (21), 6774 -6780, 1999. 10.1021/bi983074k S0006-2960(98)03074-8 Web Release Date: May 6, 1999 Copyright © 1999 American Chemical Society Binding-Dependent Disorder-Order Transition in PKI: A Fluorescence Anisotropy Study Jennifer A. Hauer, Susan S. Taylor, and David A. Johnson,* Department of Chemistry and Biochemistry and the Howard Hughes Medical Institute, University of California, San Diego, La Jolla, CA, 92093-0654, and Division of Biomedical Sciences, University of California, Riverside, Riverside, CA, 92521-0121 Received December 30, 1998 Revised Manuscript Received April 12, 1999 Abstract: The conformational flexibility of peptidyl ligands may be an essential element of many peptide-macromolecular interactions. Consequently, the -carbonyl backbone flexibility of the 8 kDa protein kinase inhibitor (PKI) peptide of cAMP-dependent protein kinase (cAPK) free in solution and bound to cAPK was assessed by time-resolved fluorescence anisotropy. Specifically, three full-length, single-site PKI mutants (V3C, S28C, and S59C) were prepared, and fluorescein iodoacetamide (FI) was selectively conjugated to the side chains of each substituted cysteine. The time-resolved anisotropy decay profiles of the labeled mutants were well fit to a model-free nonassociative biexponential equation. Free in solution, the three labeled proteins had very similar anisotropy decays arising primarily from local -carbonyl backbone movements. Only a small fraction of the anisotropy decay was associated with slower, whole-body tumbling, confirming that PKI is highly disordered at all three locations. Complexation of the mutants with the catalytic (C) subunit of cAPK decreased the rate of whole-body tumbling for all three mutants. The effects on the rapid decay processes, however, were dependent upon the site of conjugation. The anisotropy decay profiles of both FI-V3C- and FI-S28C-PKI were associated with significantly reduced contributions from the fast decay processes, while that of FI-S59C-PKI was largely unaffected by binding to the C-subunit. The results suggest that the cAPK-binding domain of PKI extends from the its N-terminus to residues beyond Ser28 but does not include the segment around Ser59, which is still part of a highly flexible domain when bound to the C-subunit. Download the full text: PDF | HTML разделы сенсорный экран детский мир wow избавиться спам скрипт рассылка объвлений апгрейд обезьяна гидрант рак кишка измеритель температры близорукость антенна решетка окон kyiv apartaments rent изделие слойка подводный гидромассаж sharp ar-m205 архитектурный визуализация иностранный долг компания петрокатридж лечение зарубежом экг 4у kyiv apartaments rent вкус цвет вино роза угловой тестомесители зубной камень болен алкоголизмом электропечь dimplex model elba neri karra кожгалантерея гостинницы спб обогащение кислородом черный кофе купить хлебопечку сенсорный экран устройство прайс эфирный антенна конкурентный анализ время архангельск купить мобильник фейрверк вечеринка корпоративный обслуживание фарфор portofino аденома измерительный комплекс к2-79 холодильный агрегат спецобувь бюро переводчик меховой холодильник выборочный лак купить чейнджер электрокардиограф компания сент-лючии contiwinterviking купить электро лаборатория мигрень гравировальный бур сервис холодильник кбе телефонный анкетирование восстановление информация избавиться спам нейминг флюоресцентный краска купить мобильник переводческий бюро срезанный цвет mobil gargoyle применение доломита калибровка цвет ваза 2111 protherm структурный штукатурка dhl спецобувь заказ мини пекарня pki